Unidad de Vesículas Extracelulares (UVEx)
Unidad de Vesículas Extracelulares (UVEx)
Responsable de la Unidad: Virginia Vila del Sol
E-mail: UVEx.hnp@sescam.jccm.es
Las Vesículas Extracelulares (VEs) son una población heterogénea de vesículas de membrana de pequeño tamaño que son secretadas tanto de forma fisiológica como en diferentes patologías por las células y que muestran distintas funciones y propiedades biológicas dependiendo de su contenido en moléculas bioactivas.Las VEs transportan información importante como proteínas, lípidos y ácidos nucleicos, especialmente ARN no codificante (miARN, lncRNA, circRNA, etc.). Las VEs se encuentran en una gran variedad de fluidos biológicos como sangre, orina, saliva, leche materna, líquido amniótico, líquido cefalorraquídeo, plasma seminal, etc. Las VEs no solo participan en los procesos de comunicación celular mediante la transmisión de información y material de célula a célula, sino que también son de gran importancia en los procesos de migración celular, angiogénesis y crecimiento de células tumorales.
En los últimos años, el estudio de Vesículas Extracelulares (VEs) como fuente prometedora de biomarcadores y su empleo como vehículo de transporte de fármacos ha ido ganando relevancia. Sin embargo, el aislamiento y caracterización de VEs suponen un desafío técnico debido a la persistencia de contaminantes de tamaños similares como lipoproteínas, agregados proteicos, microorganismos, etc. Por tanto, las técnicas de aislamiento y caracterización requieren de tecnología de vanguardia y de personal altamente especializado que trabaje de acuerdo a dos guías, MISEV 2023 y MIFlowCyt, que contienen las recomendaciones necesarias para la estandarización y publicación de los estudios con VEs.
En 2022, los Servicios de Citometría de Flujo (CITF) y Proteómica (PTMC) se asociaron en una nueva unidad interdisciplinar especializada en el estudio de VEs (UVEx), para proporcionar a los investigadores las tecnologías necesarias para el estudio completo de las VEs, desde el enriquecimiento de la muestra hasta la caracterización del cargo proteico.
La Dra. Virginia Vila del Sol, responsable de UVEx, pertenece desde el año 2021 al Grupo Español de Innovación e Investigación en Vesículas Extracelulares, GEIVEX, organización dedicada a promover la investigación, la innovación y el intercambio de conocimientos entre grupos de investigación en el campo de las VEs.
Técnicas disponibles
Todos los ensayos de vesículas extracelulares que ofrecemos se realizan de acuerdo a las guías MISEV 2023 y MIFlowCyt e incluyen,
entre otros:
Aislamiento y purificación de Vesículas Extracelulares
- Ultracentrifugación diferencial (dUC).
- Inmunocaptura (IC).
- Cromatografía de exclusión molecular (SEC).
- Ultrafiltración (UF).
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Cuantificación
- Citometría de flujo (eventos/µl).
- BCA (ug proteína total).
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Caracterización de VEs por Citometría de Flujo
- Inmunocaptura (IC).
- Detección directa de marcadores específicos de VEs:
tetraspaninas CD63, CD81 y CD9.
- Detección directa de marcadores de la célula origen.
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Caracterización de VEs por WB
- Caracterización de proteínas transmembrana mediante Western Blot (WB): CD9, CD81 y CD63.
- Caracterización de proteínas citosólicas por WB: HSP70, TSG101 ALIX.
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Análisis del cargo de VEs
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Publicaciones y comunicaciones recientes
- Mª Cristina Ortega, Pilar García-Llorena, Cristina Martos-Polo, José Alberto Suárez, Jénnifer García-Arocha, Ángela Marquina-Rodríguez, Virginia Vila-del Sol, David Otaegui y Diego Clemente “Caracterización de las vesículas extracelulares procedentes de las células mieloides supresoras: relación con la severidad clínica en la esclerosis múltiple experimental” Póster II Jornadas de Investigación Sanitaria IDISCAM. 14 Febrero 2024.
- Marquina-Rodríguez A., Ortega MC, García-Llorena P., Barroso-García G. Arandilla AG, González MJ, Clemente D, Vila-del Sol V. “Extracellula rVesicles from sorted Myeloid-Derived Suppressor Cells mantain specific staining from sorting". Poster exhibition at XVIII Congress of the IBERIAN SOCIETY of CYTOMETRY. April 19-21, 2023. (Abstract SIC 2023).
- Marquina-Rodríguez A., Barroso-García G., Arandilla AG, Ortega MC, García-Llorena P, Clemente D, Vila-del Sol V. “Implementation of an Interdisciplinary Core Facility for the study of Extracellular Vesicles at the National Hospital of Paraplegics”. Poster exhibition at 6th GEIVEX Symposium. October 25-28, 2022. (Abstract 6th Symposium GEIVEX).
- Serrano-Heras, G., Díaz-Maroto, I., Castro-Robles, B. et al. “Isolation and Quantification of Blood Apoptotic Bodies, a Non-invasive Tool to Evaluate Apoptosis in Patients with Ischemic Stroke and Neurodegenerative Diseases”.BiolProced Online 22, 17 (2020).
https://doi.org/10.1186/s12575-020-00130-8.
Personal
Dra. Virginia Vila del Sol. Responsable Científica de la unidad.
Email: vvila@sescam.jccm.es
Ángela Marquina Rodríguez. Técnico Titulada Superior.
Email: amarquinar@sescam.jccm.es
María José González López. Técnico Especialista de Laboratorio.
Email: mjgonzalezl@sescam.jccm.es
Gemma Barroso García. Técnico Titulada Superior.
Email: gbarroso@sescam.jccm.es
Dra. Sonia García-Carpintero Fernández-Pacheco. Técnico Titulada Superior.
Email: sgarciacarpintero@sescam.jccm.es
Alba González Arandilla. Especialista Espectrometría de masas.
Email: agarandilla@sescam.jccm.es
Ana Gallardo Escobar. Técnico Especialista de Laboratorio.
Email: agallardoe@sescam.jccm.es
Contacto
UVEx- Unidad de Vesículas Extracelulares
Edf. Investigación i-1. Lab 23.
Hospital Nacional de Parapléjicos
Finca La Peraleda s/n
45071 Toledo
España