Citometría

Equipo que permite el análisis de hasta ocho fluorescencias distintas, gracias a la utilización de sus tres líneas de láser (azul, 488 nm; rojo, 633 nm y violeta, 405 nm) y de sus ocho detectores independientes. Este equipo permite el análisis multiparamétrico de poblaciones celulares complejas.

TABLA CONFIGURACIÓN FACS Canto II

Este equipo permite la detección de hasta nueve fluorescencias distintas, gracias a su configuración actual con tres líneas de láser (azul, 488 nm; rojo, 633 nm y violeta, 405 nm), y tiene capacidad para detectar hasta 11 parámetros distintos. Su característica más importante es que permite la separación física a alta velocidad de poblaciones celulares, en base a la expresión diferencial de uno o varios parámetros analizables por técnicas de citometría de flujo, para su posterior utilización en ensayos bioquímicos, moleculares o incluso, de diferenciación celular.
Dispone de una unidad ACDU (Automated Cell Deposition Unit), que permite la recolección de las células separadas en placas multipocillo o portaobjetos.
Dispone de una unidad de control de temperatura de los soportes de recogida, tanto para tubos como para placas. Rango de temperatura: de 4 ºC a 42 ºC.

TABLA CONFIGURACIÓN FACS Aria IIu

Equipo que permite el análisis de hasta seis fluorescencias de forma simultánea, gracias a la utilización de sus tres líneas de láser (azul, 488 nm; amarillo/verde, 561nm y violeta, 405 nm) y de sus seis detectores independientes configurables. Este equipo permite el análisis multiparamétrico de poblaciones celulares complejas. Además, la resolución de este equipo permite distinguir partículas y vesículas extracelulares entre 80-200 nm de tamaño gracias a la medición de señales en SSC por el láser violeta. También permite contaje absoluto volumétrico.

TABLA CONFIGURACIÓN CytoFLEX S

Sistema para separar células marcadas con anticuerpos acoplados a microesferas magnéticas en columnas. 2 tipos de imanes: OctoMACS, para columnas MS (hasta 108 células totales) y MidiMACS, para columnas LS (hasta 109 células totales).

Más información

• Inmunofenotipaje: marcaje extracelular y/o intracelular con anticuerpos conjugados con fluorocromos. Análisis multiparamétrico de hasta 9 colores.
• Análisis de ciclo celular (Ioduro de propidio, Vybrant DyeCycle^TM)
• Análisis de expresión de genes indicadores/reporteros (GFP y variantes)
• Medida de proliferación celular (Tag-It Violet, CFSE, incorporación de BrdU)
• Ensayos de apoptosis (Anexina V, fase sub-G1)
• Ensayos “multiplex” para moléculas solubles (ej. Citoquinas)
• Análisis funcional: estado redox, fagocitosis, lípidos
• Separación celular activada por fluorescencia (FACS) separación de eventos raros a alta velocidad, separación de células frágiles, etc. Posibilidad de separar hasta cuatro poblaciones distintas, además de separar en placas multipocillo  o en portaobjetos. Control de Tª.
• Separación celular magnética: Sistema Miltenyi Biotec.
• Aislamiento de Vesículas Extracelulares de diferentes fluídos.
• Caracterización de Vesículas Extracelulares por Citometría de Flujo

- Reigada D, Nieto-Díaz M, Navarro-Ruiz R, Caballero-López MJ, Del Águila A, Muñoz-Galdeano T, Maza RM."Acute administration of ucf-101 ameliorates the locomotor impairments induced by a traumatic spinal cord injury” Neuroscience. (2015) Aug 6; 300:404-17. doi: 10.1016/j.neuroscience.2015.05.036.

- Doncel-Pérez E, Mateos-Hernández L, Pareja E, García-Forcada Á, Villar M, Tobes R, Romero Ganuza F, Vila-Del Sol V, Ramos R, Fernández de Mera IG, de la Fuente J. "Expression of Early Growth Response Gene-2 and Regulated Cytokines Correlates with Recovery from Guillain-Barré Syndrome”J Immunol. (2016) Feb 1;196(3):1102-7.doi: 10.4049/jimmunol.1502100

- Moliné-Velázquez V, Vila-Del Sol V, de Castro F, Clemente D. “Myeloid cell distribution and activity in multiple sclerosis” HistolHistopathol. (2016)  Apr; 31(4):357-70. doi: 10.14670/HH-11-699.

- Suardíaz M1, Clemente D2, Marin-Bañasco C3, Orpez T3, Hurtado-Guerrero I3, Pavía J4, Pinto-Medel MJ5, De Castro F2, Leyva L5, Fernández O5, Oliver B “Recombinant soluble IFN receptor (sIFNAR2) exhibits intrinsic therapeutic efficacy in a murine model of Multiple Sclerosis” Neuropharmacology. (2016) Nov;110(Pt A):480-492. doi: 10.1016/j.neuropharm.2016.07.026.

- Macrez R, Ortega MC, Bardou I, Mehra A, Fournier A, Van der Pol SM, Haelewyn B, Maubert E, Lesept F, Chevilley A, de Castro F, De Vries HE, Vivien D, Clemente D, Docagne F. “Neuroendothelial NMDA receptors as therapeutic targets in experimental autoimmune encephalomyelitis”Brain. (2016) Sep; 139(Pt 9): 2406-19. doi:10.1093/brain/aww172.

- Reigada D, Navarro-Ruiz RM, Caballero-López MJ, Del Águila Á, Muñoz-Galdeano T, Maza RM, Nieto-Díaz M. "Diadenosinetetraphosphate (Ap4A) inhibits ATP-induced excitotoxicity: a neuroprotective strategy for traumatic spinal cord injury treatment” Purinergic Signal. (2017) Mar;13(1):75-87. doi: 10.1007/s11302-016-9541-4

- Marin-Bañasco C, Benabdellah K, Melero-Jerez C, Oliver B, Pinto-Medel MJ, Hurtado-Guerrero I, de Castro F, Clemente D, Fernández O, Martin F, Leyva L, Suardíaz M. "Gene therapy with mesenchymal stem cells expressing IFN-ß ameliorates neuroinflammation in experimental models of multiple sclerosis” Br J Pharmacol. (2017) Feb; 174(3):238-253. doi: 10.1111/bph.13674.

- de la Cuesta F, Baldan-Martin M, Moreno-Luna R, Alvarez-Llamas G, Gonzalez-Calero L, Mourino-Alvarez L, Sastre-Oliva T, López JA, Vázquez J, Ruiz-Hurtado G, Segura J, Vivanco F, Ruilope LM, Barderas MG. “Kalirin and CHD7: novel endothelial dysfunction indicators in circulating extracellular vesicles from hypertensive patients with albuminuria” Oncotarget. (2017) Feb 28;8(9):15553-15562. doi: 10.18632/oncotarget.14948.

- Mecha M, Feliú A, Machín I, Cordero C, Carrillo-Salinas F, Mestre L, Hernández-Torres G, Ortega-Gutiérrez S, López-Rodríguez ML, de Castro F, Clemente D, Guaza C.” 2-AG limits Theiler's virus induced acute neuroinflammation by modulating microglia and promoting MDSCs” Glia. (2018) Jul; 66(7):1447-1463. doi: 10.1002/glia.23317

- Carolina Melero-Jerez, Margarita Suardíaz, Rafael Lebrón-Galán, Carmen Marín-Bañasco, Begoña Oliver-Martos, Isabel Machín-Díaz, ÓscarFernández, Fernando de Castro, Diego Clemente “The presence and suppressive activity of myeloid-derived suppressor cells are potentiated after interferon-β treatment in a murine model of multiple sclerosis” Neurobiology of Disease(2019) 127:13–31

- David Reigada, Andrés ÁngelCalderón‐García, Manuel Soto‐Catalán, Manuel Nieto‐Díaz, Teresa Muñoz‐Galdeano, Ángela del Águila, Rodrigo M. Maza“MicroRNA-135a-5p reduces P2X7 -dependent rise in intracellular calcium and protects against excitotoxicity” J Neurochem.(2019) Oct;151(1):116-130.

- González P1, González-Fernández C2, Campos-Martín Y3, Mollejo M3, Carballosa-Gautam M4, Marcillo A4, Norenberg M4, Rodríguez FJ “Frizzled 1 and Wnt1 as new potential therapeutic targets in the traumatically injured spinal cord”Cell Mol Life Sci.(2020) Jan 3. doi: 10.1007/s00018-019-03427-4.

- Hélie, P; Camacho-Toledano, C; Lesec, L; Seillier, C; Miralles, AJ; Ortega, MC; Guérit, S; Lebas, H; Bardou, I; Vila-del Sol, V; Vivien, D; Le Mauff, B; Clemente, D; Docagne, F; Toutirais, O (2021) Tissue plasminogen activator worsens experimental autoimmune encephalomyelitis by complementary actions on lymphoid and myeloid cell responses. J Neuroinflammation 18, 52. https://doi.org/10.1186/s12974-021-02102-5

- Rosa, JM; Farré-Alins, V; Ortega, MC; Navarrete, M; Lopez-Rodriguez, A; Palomino-Antolin, A; Fernandez-Lopez, E; Decouty, C; Narros-Fernández, P; Vila-del Sol, V; Clemente, D; Egea, Javier. (2021) TLR4-pathway impairs synaptic number and cerebrovascular functions through astrocyte activation following traumatic brain injury. British Journal of Pharmacology, DOI: 10.1002/BPH.15488